高压蒸汽灭菌用途广,效率高,是微生物学实验中常用的灭菌方法。这种灭菌方法是基于水的沸点随着蒸汽压力的升高而升高的原理设计的。当蒸汽压力达到1.05kg/cm2时,水蒸气的温度升高到121℃,经15~30min,可全部杀死锅内物品上的各种微生物和它们的孢子或芽孢。一般培养基、玻璃器皿以及传染性标本和工作服等都可应用此法灭菌。
高压灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的高压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸气不能溢出,而增加了灭菌锅内的压力,从而使沸点增高,得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
在使用高压灭菌锅灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压,所以,当水蒸汽中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。所以饱和蒸汽的灭菌更彻底。
在同一温度下,高压灭菌锅湿热的杀菌效力比干热大,其原因是:
湿热的穿透力比干热大;
湿热中细菌菌体吸收水分,蛋白质较易凝固,因蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低;
湿热的蒸汽有潜热存在,每1克水在100℃时,由气态变为液态时可放出2.26kJ的热量。这种潜热能迅速提高被灭菌物体的温度,从而增加灭菌效力。
